【前言简介】
β-内酰胺酶是通过切割β-内酰胺环使β-内酰胺失活的酶，从而在产生这些酶的细菌中诱导对这种抗生素的耐药性。在β-内酰胺酶中，具有超广谱（ESBL）的酶对大多数β-内酰胺类产生耐药性，包括第三代头孢菌素，从而缩短了治疗细菌感染的治疗窗口。CTX-M家族的ESBLs属于β-内酰胺酶的A类，就像TEM、SHV和KPC型碳青霉烯酶一样。由于它们的进化，特别是由于它们与可移动遗传元件的结合，CTX-M酶是ESBL的重要组成部分，并在许多肠杆菌科中传播，特别是在大肠杆菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、柠檬酸杆菌属中，也在其他肠杆菌科如摩根氏菌属中传播。CTX-M有250多种变体。他们被分为6个主要家族，其中第1组（其主要代表为CTX-M-15）和第9组（其重要代表为CTX-M-14和CTX-M-27）是全球ESBLs流行率增加的主要原因，无论是在社区还是医院环境中。携带CTX-M的大肠杆菌是复发性尿路感染的常见原因。鉴定代表ESBL主要部分的CTX-M-14和15的测试是一种允许更合理地使用最后手段的抗生素（如碳青霉烯类）的工具。
【检测原理】
β-内酰胺酶试剂盒是基于胶体金纳米颗粒膜技术的即用型检测试剂盒，可用于检测琼脂培养皿上生长的肠杆菌科菌落中的1组（CTX-M-15样）和9组（CTX-M-14样）CTX-M型β-内酰胺酶。
用针对1组（CTX-M-15）β-内酰胺酶的一个表位的单克隆抗体和针对9组（CTX-M-14）β-内酰胺酶的第二个单克隆抗体对硝酸纤维素膜致敏。有两种不同的共轭物与胶体金颗粒结合并在膜上干燥：针对CTX-M β-内酰胺酶第二表位的共轭物和验证检测卡的质控共轭物。
当所提供的含有重悬细菌的缓冲液与膜接触时，溶解的共轭物和样本材料通过被动扩散迁移，共轭物和样本材料都接触到被吸附在硝酸纤维素膜上的第一个抗CTX-M-15抗体。若样本中含有CTX-M-15 β-内酰胺酶（或者1组中的其他CTX-M酶），则共轭物-CTX-M-15复合物将继续与第一条线（底部）上的吸附在硝酸纤维素膜上的抗CTX-M-15抗体（线15）结合。通过被动扩散继续迁移，共轭物和样本材料都与吸附在硝酸纤维素膜上的第二条抗CTX-M-14抗体线接触，若样本中含有CTX-M-14 β-内酰胺酶（或者9组中的其他CTX-M酶），则共轭物-CTX-M-14复合物将继续与第二条线上的吸附在硝酸纤维素膜上的抗CTX-M-14抗体（线14）结合。最后，溶液继续迁移到结合了质控共轭物的第三条质控线（顶部，线C）上，并生成一条红线。15分钟内根据检测卡上的红色线条读取结果。
【储存】
β-内酰胺酶未开封的试剂盒应储存在4-30℃下，可储存至有效期；一旦打开检测卡包装袋，必须立即进行检测；避免冷冻检测卡缓冲液
【样品收集及处理】
待测标本应采用标准的微生物学方法来获得和处理。
确保样品没有用含有甲醛或其衍生物的溶液进行处理。
【准备工作】
β-内酰胺酶试剂盒检测前，将试剂盒所有组分和样本（含有待测菌落的培养皿储存在4℃下）平衡至室温（15-30℃），打开检测卡包装袋并取出检测卡，立即进行检测，需标记患者名字或样本编号（一个样本以个检测卡）
β-内酰胺酶检测时样品准备：
关于除细菌菌落以外的样品类型的性能声明尚未确定，我们建议使用新鲜的菌落来获得最佳的测试性能。
1）准备一支收集管并加入4滴LY-E缓冲液
2）用一次性细菌接种环取3个菌落，并将细菌接种环浸入含有缓冲液的收集管底部，以收集细菌
3）在取出细菌接种环之前彻底搅拌混匀
4）封闭收集管并涡旋均质化
5）使用试剂盒提供的一次性移液管吸取100µL稀释后的样本并加入检测卡上的样本孔中（稀释后的样品体积必须达到移液管显示的黑线，才能准确地吸取100µL）
6）等待反应15分钟后读取结果
β-内酰胺酶试剂盒检测局限性
本试验是定性的，不能预测样品中抗原的数量；必须考虑临床表现和其他检测结果来确定诊断；阳性检测并不排除可能存在其他抗生素耐药性机制的可能性。
