【前言简介】
鲍曼不动杆菌是一种重要的机会性和耐多药的革兰氏阴性菌，负责在卫生设施的医院感染。如果不加以治疗，这种感染可能会导致败血症和死亡。碳青霉烯水解氧西林酶（OXAs）是不动杆菌中最常见的碳青霉烯耐药决定因素，特别是鲍曼不动杆菌。在OXAs中，OXA-23是鲍曼不动杆菌分离株中最普遍的碳青霉烯类耐药决定因子。OXA-23已在其他细菌物种中检测到，如染色体或质粒基因，可构成该抗性因子水平传播的宿主。因此，检测该耐药因子OXA-23，不仅在耐药物种中，而且在携带者物种中，对在医院控制抗生素耐药性至关重要。目前，OXA-23的确诊依赖于分子扩增分析和DNA测序。这些测试费用昂贵，只能在专门的环境中由熟练的工作人员执行，因此限制了它们更广泛的使用。国际专家和卫生当局认为，开发新的快速诊断试验以跟踪抗菌素耐药性模式是优先的核心行动之一。本试剂盒的检测目的在快速识别OXA-23碳青霉烯酶（和OXA-23组的变体），确保了患者的有效治疗和预防OXA-23不动杆菌的传播。特别是在医院。
【检测原理】
本试剂盒是基于胶体金纳米颗粒膜技术的即用型检测试剂盒，使用一种直接针对OXA-23碳青霉烯酶的一个表位的单克隆抗体对硝酸纤维素膜致敏，另一种直接针对OXA-23碳青霉烯酶第二表位的单克隆抗体与胶体金纳米颗粒共轭并在膜上干燥。
本试验目的是检测琼脂培养皿上生长的单一细菌菌落分离物中的OXA-23样碳青霉烯酶。样本必须使用试剂盒提供的稀释缓冲液稀释，当含有重悬细菌的缓冲液与膜接触时，溶解的共轭物通过被动扩散与样本迁移，共轭物和样本材料都接触到吸附在硝酸纤维素膜上的抗OXA-23抗体。若样本中含有OXA-23碳青霉烯酶，则由共轭物-OXA-23复合物继续与吸附在硝酸纤维素膜上的抗OXA-23抗体结合。溶液继续迁移到达质控线与质控共轭物结合生成第二条红线。15分钟内根据检测卡上的红色线条读取结果。
【试剂盒组成成分】
1）OXA-23检测卡： 20x，检测卡，单独包装
2）LY-A缓冲液： 15mL，含Tris、叠氮化钠（＜0.1%）和洗涤剂，pH7.5的盐溶液
3）带滴管的半刚性一次性收集管： 20x
4）使用说明书： 1x
【储存】
未开封的试剂盒应储存在4-30℃下，可储存至有效期；一旦打开检测卡包装袋，必须立即进行检测；避免冷冻检测卡缓冲液
【样品收集及处理】
待测标本应采用标准的微生物学方法来获得和处理。
确保样品没有用含有甲醛或其衍生物的溶液进行处理。
【准备工作】
检测前，将试剂盒所有组分和样本（含有待测菌落的培养皿储存在4℃下）平衡至室温（15-30℃），打开检测卡包装袋并取出检测卡，立即进行检测，需标记患者名字或样本编号（一个样本以个检测卡）
样品准备：
我们建议使用新鲜的菌落来获得最佳的测试性能。
1）准备一支半刚性试管并加入10滴LY-A缓冲液
2）用一次性细菌接种环取1个菌落，并将细菌接种环浸入含有缓冲液的收集管底部，以收集细菌
3）在取出细菌接种环之前彻底搅拌混匀
4）将滴管插入试管中并涡旋均质化
5）滴加3滴稀释后的样本至检测卡样本孔中，或者，用微量移液器吸取100µL稀释后的样本并加入检测卡上的样本孔中
6）等待反应15分钟后读取结果
当检测线和质控线可见时，可以更早地报告阳性结果。在超过反应时间后，不要考虑新线的出现。结果必须在仍然湿的检测卡上读取。
注：Positive（阳性）；Negative（阴性）；Invalid（无效）
阴性结果：检测卡阅读框中的质控线（C）出现一条红紫色的线，无其他线出现
阳性结果：质控线出现一条红紫色的线（C），检测区出现一条红紫色的线（T），检测线的强度可能根据样本中存在抗原的数量而变化。任何红紫色的检测线出现，即使是微弱的，也应被认为是阳性结果。
无效结果：没有质控线出现，表示试验失败，应使用新的检测卡重新检测
注意：在干燥过程中，在检测线的位置可能会出现一个非常微弱的阴影，它不应该被视为一个阳性的结果。
【性能】
检测限：用纯化的OXA-23重组蛋白测定的检测限为0.156 ng/ml
可重复性和可再现性
为了检验批次内的准确性（可重复性），相同的阳性样品和缓冲溶液在相同的实验条件下，在相同生产批次的试剂盒上处理15次。所有观察结果均与预期一致。
为了检验批次间的准确性（重现性），一些样品（阳性和缓冲液）对来自三个不同生产批次的试剂盒进行了处理。所有结果均符合预期的结果。
局限性
本试验是定性的，不能预测样品中抗原的数量；必须考虑临床表现和其他检测结果来确定诊断；阳性检测并不排除可能存在其他抗生素耐药性机制的可能性。
技术问题/投诉
如果您遇到技术问题或性能与本包中指示的不一致：
1）记录有关试剂盒的批号。
2）如果可能，在索赔处理期间，将样品保持在适当的储存条件下。
【废物处理】
按照良好的实验室规范处理使用过的手套、安全眼镜和设备；每个用户负责管理产生的任何废物，必须按照适用的法律进行处理。
【注意事项】
1）所有与使用测试相关的操作都必须按照良好的实验室规范进行。
2）所有试剂仅用于体外诊断。
3）小瓶必须小心打开。
4）避免用手指接触硝酸纤维素膜。
5）在处理样品时要戴手套。
6）绝不能使用来自其他试剂盒的试剂。
7）绿线表示免疫反应剂的吸附位点。绿色在测试过程中就消失了。
8）试剂的质量不能保证超过其保质期日期，或者如果试剂不能在说明书中规定的要求条件下存储。
